Экспериментальное исследование выполнено на 100 половозрелых самцах белых беспородных крыс, имеющих массу тела 160-180 г. В качестве объекта исследования использовали быстрорастущую соединительнотканную опухоль – саркому-М-1, которая представляет собой низкодифференцированную опухоль с высоким пролиферативным потенциалом. Этот перевиваемый штамм обладает слабой иммуногенностью и представляет удобную модель для проведения морфо-кинетических исследований и изучения основных закономерностей действия ФДТ на злокачественные новообразования.
Общую гистологию саркомы изучали на срезах, окрашенных гематоксилином и эозином. Для иммуноокрашивания пролиферирующих клеток использовали мышиные моноклональные антитела к PCNA при разведении 1:50 (клон PC 10, Calbiochem) и биотин-стрептавидин-пероксидазный набор для выявления мышиных иммуноглобулинов (ICN). Функциональную активность опухолевых клеток изучали методом избирательной импрегнации ядрышковых организаторов. Изучение характера распределения и подсчет апоптотических клеток в паренхиме опухоли проводили на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином и импрегнированных по методу Мозера.
Исследования по определению PCNA, количественной плотности ядер опухолевых клеток, PCNA-положительных ядер и параметров зон ядрышковых организаторов выполнены с помощью системы компьютерного анализа микроскопических изображений IMSTAR (Франция) с применением прикладных компьютерных лицензионных программ Morphostar-2 и Colquant-2, согласно основным принципам стереологии в морфометрии.
В результате экспериментального исследования была доказана высокая эффективность ФДТ с новым отечественным фотосенсибилизатором хлоринового ряда Фотодитазином.
На основании морфофункционального анализа были изучены механизмы ФДТ с Фотодитазином, которые включают в себя: разрушение микроциркуляторного русла; быстрое ингибирование пролиферативной и функциональной активности опухолевых клеток; индукция апоптоза; развитие некроза в ранние сроки.
Нами были установлены тканевые и клеточные мишени «Фотодитазина»: стенка кровеносных сосудов; плазматическая мембрана опухолевых клеток; внутриклеточные структуры и механизмы, ответственные за пролиферацию и биосинтез.
Была установлена прямая корреляция между наблюдаемыми противоопухолевыми эффектами и плотностью подводимой световой энергии.
Полученные данные создали теоретические предпосылки для разработки терапевтической схемы применения Фотодитазина и эффективного протокола лечения онкологических больных раком кожи.
Романко Ю. С, Сухова Т. Е., Попучиев В. В., Каплан М. А., Молочков В. А., Таранец Т. А. Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М. Ф. Владимирского (г. Москва), Медицинский радиологический научный центр РАМН (г. Обнинск)