Традиционно окончательный диагноз урогенитального трихомониаза зависит от микроскопических исследований нативного препарата выделений из влагалища, цервикального канала, уретры, прямой кишки. Более распространенной является методика фиксированного окрашенного мазка.
Метод живой культуры на питательном бульоне, несмотря на довольно высокую диагностическую ценность, имеет ограничения, связанные с временным фактором и условиями культивирования. Использование ПЦР и иммуноферментного анализа для выявления Ig M и Ig G в сыворотке крови ограничивается рамками вспомогательного метода. Совершенно новым методом лабораторной диагностики урогенитального трихомониаза является выявление возбудителя заболевания в соскобах со слизистых человека методом иммуноферментного анализа.
Целью настоящего исследования явилось, прикладное значение и изучение диагностической ценности различных методов лабораторной диагностики урогенитального трихомониаза.
Обследовано 14 женщин с установленным диагнозом: урогенитальный трихомониаз
Материал для исследования брали из уретры, цервикального канала, влагалища, прямой кишки. Одновременно проводили микроскопию окрашенных препаратов, культуральное исследование, ПЦР и выявляли возбудителя заболевания в соскобах со слизистых методом иммуноферментного анализа (ИФА).
В отделяемом из уретры и цервикального канала урогенитальные трихомонады наиболее часто выявляются при микроскопии окрашенных препаратов (28 % и 57 % наблюдений, соответственно).
В цервикальном канале в 57 % наблюдений также удается обнаружить простейших в соскобах со слизистых методом ИФА.
Полимеразная цепная реакция является ведущим методом диагностики при локализации трихомонад во влагалище (43 %) и прямой кишке (7 %). При культуральном исследовании удается выявить простейших преимущественно во влагалище (36 %).
Положительные результаты микроскопии окрашенных препаратов у половины пациентов не подтверждаются другими лабораторными методами урогенитального трихомониаза. Только методом ИФА удается обнаружить простейших в соскобах со слизистых у 57 % больных. Для ПЦР характерно 15 % неподтвержденных другими методами положительных результатов. Положительные результаты культурального исследования урогенитального трихомониаза в 100 % случаев подтверждаются другими лабораторными методами.
Совпадение положительных результатов нескольких лабораторных методов исследования урогенитального трихомониаза (бактериоскопии, культурального метода и ПЦР) наблюдается у 50 % пациентов, перечисленных методов и результатов ИФА соскоба со слизистых – в 14 % случаев.
Следовательно, культуральное исследование является наиболее достоверным методом лабораторной диагностики по сравнению с микроскопией окрашенных препаратов, ПЦР и иммуноферментным анализом соскобов со слизистых.
Влияние нитрозогуанидина на характеристики влагалищных трихомонад
В последние годы наблюдается увеличение частоты инфекционно-воспалительных заболеваний урогенитального тракта, вызванных Т. vaginalis. Несмотря на относительно малые размеры, трихомонады имеют сложную морфологию и метаболизм. Размеры простейшего зависят от стадии заболевания, темпов роста, особенностей штамма.
Урогенитальная трихомонада подвержена значительной модификационной изменчивости, возникающей под влиянием физико-химических условий среды обитания и фазы роста.
Камнем раздора является проблема существования атипичных форм простейших трихомонад. Дискутируется вопрос о том, могут ли трихомонады кроме активно двигающейся с помощью ундулирующей мембраны, трофозоидной формы, иметь другие фенотипы, в частности неподвижные, безжгутиковые (амастиготные)? В немалой степени эту проблему создала обычная световая микроскопия с малой разрешающей способностью, а зачастую и низкая квалификация врачей-лаборантов.
Целью настоящего исследования послужило изучение морфологической изменчивости урогенитальных трихомонад под влиянием внешнего раздражителя – мутагена нитрозогуанидина.
Главный астролог страны раскрыла секрет привлечения богатства и процветания для трех знаков зодиака, вы можете проверить себя Бесплатно ⇒ ⇒ ⇒ ЧИТАТЬ ПОДРОБНЕЕ….
К суточной культуре простейших добавляли мутаген в дозе 500 мкг/мл. Рабочую концентрацию мутагена получали разведением его с помощью ацетатного буфера (рН 7,4) или питательной среды. Продолжительность воздействия 15 и 30 минут. Для остановки действия мутагена опытные образцы трижды отмывали буфером или питательной средой, соответственно. Микроскопию нативных препаратов осуществляли с помощью микроскопа Микмед 2, вар.2 (ок. 10*/16, об. 40) при спущенном конденсоре. Оставшуюся культуру хранили в термостате при 37°С в течение 12 суток, ежедневно микроскопируя осадок.
Под влиянием мутагена в течение 15 и 30 минут наблюдалось образование скоплений простейших (по 50-100 особей).
При этом отмечена своеобразная ориентация трихомонад.
Головной конец с фиксированными на нем активно движущимися жгутиками располагался наружу. Простейшие притягивали с помощью жгутиков плавающие в растворе эпителиальные клетки, единичные особи были фиксированы на них.
Наблюдался выраженный полиморфизм трихомонад:
помимо типичных морфотипов простейших в конгломератах присутствовали круглые и овальные особи, содержащие в протоплазме обилие питательных частиц.
По мере увеличения продолжительности инкубации трихомонад, в культуре увеличивалось число единичных свободнодвижущихся простейших, уменьшалось их количество в когломератах. Увеличивался полиморфизм. Наблюдалось скопление мелких и крупных, круглых, овальных и грушевидной форм.
Преобладали овальные морфотипы простейших. Отмечены единичные многоядерные трихомонады с множественными жгутиками на поверхности мембраны и безъядерные особи. Движения жгутиков медленные. Отмечено образование вакуолей в протоплазме и наличие каплевидных образований на поверхности трихомонад. Иногда единичная круглая вакуоль занимала почти все внутреннее пространство особи. Изменялся тип движения простейших – от характерных толчкообразных до маятникоподобных и движений – по часовой и против часовой стрелки.
Выявленные морфотипы влагалищных трихомонад могут быть связаны с особенностями адаптации простейших к изменению условий окружающей среды или с размножением. Поэтому круглые, овальные, многоядерные, обезъядерные формы вряд ли можно назвать атипичными, скорее всего, это лишь разные стадии развития паразита. Приоритет в решении этого вопроса за электронной микроскопией.
Сюч Н. И., Мачкалян К. Э. Городская клиническая больница № 14 имени В. Г. Короленко (г. Москва)